Il corso ha l'obiettivo principale di fornire una panoramica dei metodi biochimici applicati nel contesto della ricerca sperimentale, della medicina e delle biotecnologie. Particolare attenzione sarà rivolta alla produzione e caratterizzazione di proteine (anticorpi, enzimi naturali e ricombinanti, ormoni proteici) e alla loro applicazione nella diagnostica, nella terapia e nell'industria. Al termine del corso lo studente dovrà riuscire ad affrontare la descrizione teorica e pratica di alcune delle più comuni tecniche usate in ambito biochimico e dimostrare capacità critiche nella descrizione di problematiche di studio della biochimica sperimentale.
Prerequisiti
Conoscenze di base di biochimica, con particolare riferimento alla struttura e funzione di proteine ed enzimi.
Metodi didattici
Lezioni frontali, seminari su argomenti specifici, dimostrazioni pratiche sul funzionamento degli strumenti utilizzati in ambito biochimico.
Sono previste modalità didattiche integrative dedicate esclusivamente a studenti che rientrino in specifiche categorie individuate dall'ateneo (es. studenti disabili, caregivers, studenti lavoratori) e che siano impossibilitati a seguire le lezioni in presenza.
Verifica Apprendimento
Esame orale e presentazione di un articolo scientifico. Descrizione dei metodi utilizzati nel lavoro e discussione dei risultati ottenuti. La valutazione sarà espressa in trentesimi, con la possibilità di lode. In ogni sessione di esame saranno istituiti diversi appelli con adeguato anticipo rispetto alle sedute di laurea. In particolare, per facilitare il conseguimento del titolo agli studenti iscritti al secondo anno della Laurea Magistrale saranno programmati numerosi appelli durante la sessione di giugno-luglio.
Testi
Metodologie biochimiche e biomolecolari (Maccarrone) - Zanichelli Metodologie biochimiche (Bonaccorsi di Patti, Contestabile, Di Salvo) - Zanichelli
Contenuti
Tecnologia del DNA ricombinante: clonaggio, mutagenesi ed espressione di proteine ricombinanti. PCR e real-time PCR. Metodi per l'estrazione e purificazione di proteine da tessuti animali/vegetali e colture cellulari. Processi di purificazione primaria. Aspetti teorici/pratici dei vari processi cromatografici. Elettroforesi mono e bidimensionale. Metodi spettroscopici di caratterizzazione delle proteine. Spettrometria di Massa. Radioisotopi: principi teorici, manipolazione, tipi di decadimento, metodi e strumenti per la misura della radioattività. Datazione al carbonio 14. Utilizzo di sostanze radioattive nelle applicazioni biochimiche. Tecniche immunologiche: produzione e purificazione di anticorpi policlonali e monoclonali e loro uso nello studio della biochimica e nella terapia. Saggi ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay). Principi biochimici alla base dei test molecolari e antigenici per la diagnosi di infezioni virali. Analisi in immunofluorescenza: microscopia a fluorescenza e confocale, citofluorimetria.
