ID:
501316
Durata (ore):
48
CFU:
6
SSD:
BIOCHIMICA
Anno:
2023
Dati Generali
Periodo di attività
Secondo Semestre (04/03/2024 - 21/06/2024)
Syllabus
Obiettivi Formativi
Il Corso si propone di fornire allo studente gli strumenti conoscitivi e metodologici necessari per:
- comprendere i principi teorici su cui si basano le principali tecniche per la purificazione e l'analisi delle proteine.
- comprendere i protocolli per la produzione di anticorpi policlonali e monoclonali e per la produzione delle proteine ricombinanti.
- comprendere i principi teorici su cui si basano le principali tecniche di analisi e manipolazione del DNA.
- comprendere i principi teorici su cui si basano i dosaggi dei principali biomarcatori in biochimica clinica.
Al termine del corso lo studente dovrà:
- conoscere la differenza fra le principali tecniche di analisi delle proteine e del DNA.
- conoscere i protocolli di purificazione delle proteine e di produzione di anticorpi e produzione di proteine ricombinanti.
- conoscere i principi teorici su cui si basano i dosaggi dei principali biomarcatori utilizzati in biochimica clinica.
- saper risolvere autonomamente problematiche sperimentali proposte durante l'esame, utilizzando le tecniche apprese durante il corso.
L'autonomia di giudizio sarà stimolata durante l'erogazione delle lezioni frontali.
- comprendere i principi teorici su cui si basano le principali tecniche per la purificazione e l'analisi delle proteine.
- comprendere i protocolli per la produzione di anticorpi policlonali e monoclonali e per la produzione delle proteine ricombinanti.
- comprendere i principi teorici su cui si basano le principali tecniche di analisi e manipolazione del DNA.
- comprendere i principi teorici su cui si basano i dosaggi dei principali biomarcatori in biochimica clinica.
Al termine del corso lo studente dovrà:
- conoscere la differenza fra le principali tecniche di analisi delle proteine e del DNA.
- conoscere i protocolli di purificazione delle proteine e di produzione di anticorpi e produzione di proteine ricombinanti.
- conoscere i principi teorici su cui si basano i dosaggi dei principali biomarcatori utilizzati in biochimica clinica.
- saper risolvere autonomamente problematiche sperimentali proposte durante l'esame, utilizzando le tecniche apprese durante il corso.
L'autonomia di giudizio sarà stimolata durante l'erogazione delle lezioni frontali.
Prerequisiti
La comprensione degli argomenti svolti nel corso di Biochimica applicata con fondamenti di biochimica clinica richiede che lo studente sia in possesso delle nozioni di Biochimica riguardanti la struttura e proprietà degli amminoacidi e delle proteine. Inoltre è necessario che lo studente sia in grado di riconoscere i gruppi funzionali dei principali composti organici e la struttura dei composti eterociclici.
Metodi didattici
Lezioni frontali.
Su richiesta la docente è disponibili per chiarimenti sugli argomenti trattati a lezione.
Le diapositive delle lezioni e ulteriori informazioni sono disponibili sulla piattaforma moodle KIRO.
Su richiesta la docente è disponibili per chiarimenti sugli argomenti trattati a lezione.
Le diapositive delle lezioni e ulteriori informazioni sono disponibili sulla piattaforma moodle KIRO.
Verifica Apprendimento
L'esame finale di profitto si svolge mediante una prova orale. Lo studente sarà stimolato a discutere di approcci sperimentali utilizzabili per risolvere problematiche proposte dal docente. Alla fine del corso è prevista una verifica in itinere riservata agli studenti iscritti al terzo anno.
La prova si intende superata con una valutazione NON inferiore a 18/30.
Sono previste modalità di esame appropriate per gli studenti che rientrano nelle categorie previste per i Disturbi Specifici dell'Apprendimento (DSA) ed i Bisogni Educativi Speciali (BSA).
La prova si intende superata con una valutazione NON inferiore a 18/30.
Sono previste modalità di esame appropriate per gli studenti che rientrano nelle categorie previste per i Disturbi Specifici dell'Apprendimento (DSA) ed i Bisogni Educativi Speciali (BSA).
Testi
Maccarone, Metodologie biochimiche e biomolecolari, Zanichelli, ISBN 978-88-08-52055-5
Bonaccorsi di Patti, Contestabile, Di Salvo, Metodologie biochimiche, Zanichelli, ISBN 978-88-08-52058-6
Nelson, Cox, Introduzione alla biochimica di Lehninger, Zanichelli, ISBN 9788808723284
Bonaccorsi di Patti, Contestabile, Di Salvo, Metodologie biochimiche, Zanichelli, ISBN 978-88-08-52058-6
Nelson, Cox, Introduzione alla biochimica di Lehninger, Zanichelli, ISBN 9788808723284
Contenuti
Metodi di omogeneizzazione di tessuti e di separazione dei costituenti subcellulari. Metodi di estrazione delle proteine da diversi tipi di tessuti. Precipitazione frazionata di proteine: precipitazione frazionata con solfato d'ammonio e isoelettrica; precipitazione con solventi organici; precipitazione al calore. La dialisi: principi e applicazioni.
Spettrofotometria: principi e applicazioni. Legge di Lambert-Beer. Dosaggi colorimetrici.
Tecniche cromatografiche: principi generali, parametri cromatografici e piatti teorici. Cromatografia su colonna. Cromatografia di adsorbimento e ripartizione. Cenni sulla TLC. Cromatografia a scambio ionico. Cromatografia per gel filtrazione. Cromatografia di affinità. Cromatografia per interazione idrofobica.
Cromatografia liquida ad alta prestazione (HPLC): descrizione delle varie componenti di un cromatografo ad alta prestazione. Cromatografia in fase normale (NP-HPLC) e in fase inversa (RP-HPLC). Accoppiamento ionico.
Fast protein liquid cromatography (FPLC): principi e applicazioni.
Tecniche elettroforetiche: principi generali e fattori che influenzano la mobilità elettroforetica. Elettroforesi in fase libera: cenni. Elettroforesi su gel: SDS -PAGE ed elettroforesi su gel di agarosio. Western blotting. Cenni all’isoelettrofocalizzazione e all’elettroforesi bidimensionale. Elettroforesi capillare.
Spettrometria di massa: principi e applicazioni. Ionizzazione per electrospray (ESI) e ionizzazione MALDI. Analizzatore a quadrupolo e a tempo di volo (TOF).
Produzione di anticorpi monoclonali: tecnica degli ibridomi.
Struttura e funzione degli acidi nucleici: basi azotate, nucleosidi, nucleotidi e legame fosfodiestere. Struttura primaria, secondaria e terziaria. Superavvolgimenti e organizzazione del cromosoma procariotico. Il cromosoma eucariotico: ruolo degli istoni nell’organizzazione della cromatina. DNA polimerasi procariotiche. Duplicazione del DNA: fasi di inizio, allungamento e terminazione. Sintesi del filamento veloce e del filamento lento: i frammenti di Okazaki. Replicazione del DNA. Struttura, sintesi e maturazione dell’RNA. Il codice genetico. La sintesi proteica: attivazione degli amminoacidi, inizio, allungamento e terminazione. Controllo dell’espressione genica nei procarioti: operone lattosio e operone triptofano.
Metodi di purificazione del DNA. Enzimi di restrizione: caratteristiche e applicazioni nell’analisi del genoma. Elettroforesi del DNA. Amplificazione del DNA mediante PCR. Metodo di Sanger per determinare la sequenza del DNA. Tecniche di clonaggio ed espressione di proteine ricombinanti.
Basi di biochimica ed enzimologia clinica. Profili biochimici di rilevanza clinica: profilo glucidico e metodi di dosaggio; profilo proteico: proteine plasmatiche e loro funzioni, protidogramma e stati patologici; profilo lipidico: funzioni principali delle lipoproteine plasmatiche e dosaggio del colesterolo. Dosaggio di enzimi a scopo diagnostico: descrizione dei principali enzimi utilizzati in diagnostica, valutazione del loro significato clinico e descrizione dei metodi di dosaggio.
Spettrofotometria: principi e applicazioni. Legge di Lambert-Beer. Dosaggi colorimetrici.
Tecniche cromatografiche: principi generali, parametri cromatografici e piatti teorici. Cromatografia su colonna. Cromatografia di adsorbimento e ripartizione. Cenni sulla TLC. Cromatografia a scambio ionico. Cromatografia per gel filtrazione. Cromatografia di affinità. Cromatografia per interazione idrofobica.
Cromatografia liquida ad alta prestazione (HPLC): descrizione delle varie componenti di un cromatografo ad alta prestazione. Cromatografia in fase normale (NP-HPLC) e in fase inversa (RP-HPLC). Accoppiamento ionico.
Fast protein liquid cromatography (FPLC): principi e applicazioni.
Tecniche elettroforetiche: principi generali e fattori che influenzano la mobilità elettroforetica. Elettroforesi in fase libera: cenni. Elettroforesi su gel: SDS -PAGE ed elettroforesi su gel di agarosio. Western blotting. Cenni all’isoelettrofocalizzazione e all’elettroforesi bidimensionale. Elettroforesi capillare.
Spettrometria di massa: principi e applicazioni. Ionizzazione per electrospray (ESI) e ionizzazione MALDI. Analizzatore a quadrupolo e a tempo di volo (TOF).
Produzione di anticorpi monoclonali: tecnica degli ibridomi.
Struttura e funzione degli acidi nucleici: basi azotate, nucleosidi, nucleotidi e legame fosfodiestere. Struttura primaria, secondaria e terziaria. Superavvolgimenti e organizzazione del cromosoma procariotico. Il cromosoma eucariotico: ruolo degli istoni nell’organizzazione della cromatina. DNA polimerasi procariotiche. Duplicazione del DNA: fasi di inizio, allungamento e terminazione. Sintesi del filamento veloce e del filamento lento: i frammenti di Okazaki. Replicazione del DNA. Struttura, sintesi e maturazione dell’RNA. Il codice genetico. La sintesi proteica: attivazione degli amminoacidi, inizio, allungamento e terminazione. Controllo dell’espressione genica nei procarioti: operone lattosio e operone triptofano.
Metodi di purificazione del DNA. Enzimi di restrizione: caratteristiche e applicazioni nell’analisi del genoma. Elettroforesi del DNA. Amplificazione del DNA mediante PCR. Metodo di Sanger per determinare la sequenza del DNA. Tecniche di clonaggio ed espressione di proteine ricombinanti.
Basi di biochimica ed enzimologia clinica. Profili biochimici di rilevanza clinica: profilo glucidico e metodi di dosaggio; profilo proteico: proteine plasmatiche e loro funzioni, protidogramma e stati patologici; profilo lipidico: funzioni principali delle lipoproteine plasmatiche e dosaggio del colesterolo. Dosaggio di enzimi a scopo diagnostico: descrizione dei principali enzimi utilizzati in diagnostica, valutazione del loro significato clinico e descrizione dei metodi di dosaggio.
Lingua Insegnamento
ITALIANO
Corsi
Corsi
FARMACIA
Laurea Magistrale Ciclo Unico 5 Anni
5 anni
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